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PacBio建库测序

PacBio和ONT作为主流长读长测序平台，在技术原理、性能特点和应用场景上各有优势，选择需根据研究需求综合评估。技术原理对比PacBio SMRT测序基于单分子实时（SMRT）技术，通过观察DNA聚合酶合成互补链时荧光标记碱基（dNTP）的发光信号，实时读取序列。

综上所述，PacBio测序技术作为一种先进的单分子实时测序技术，在生命科学领域具有广泛的应用前景。通过深入了解其上游建库、测序过程以及下游数据分析等细节方面，可以更好地发挥PacBio测序技术的优势，为基因组学、转录组学等领域的研究提供更加准确、可靠的数据支持。

LILAP是一种基于Tn5转座酶的三代低DNA输入量（100 ng）、无扩增、低成本的PacBio建库技术，由张勇与阮珏团队合作开发，适用于解析小型生物及其内共生体基因组，具有流程简化、成本低、应用场景广泛等特点。

技术原理与参考文献技术原理：通过优化SMRTbell？ prep kit 0建库流程，减少DNA损失并提升文库转化效率，结合PacBio Revio平台的长读长特性，实现低起始量下的高质量测序。参考文献：[1] Ebert P， et al. (2021). Science. 揭示HiFi数据在结构变异分析中的优势。

Pacbio测序也是边合成边测序。DNA polymor固定在玻璃底板上：首先在聚合酶上标上生物素，在玻璃底板上标上链酶亲和素。利用生物素和链合亲霉素的亲和力结合在一起。加入带四色荧光的dNTP引物，酶会长时间的抓住这个dNTP，激发光从底部照射进来，能在较长时间内发出荧光。